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Las unidades estructuras pretendidas para su uso en sistemas de expresión de levadura o eucariotas preferiblemente incluyen una secuencia líder que permite la secreción extracelular de proteína traducida mediante una célula huésped. Como alternativa, si se miostatina y diabetes proteína recombinante sin una secuencia líder o de transporte, puede incluir un residuo de metionilo amino terminal.

Este residuo puede o no escindirse posteriormente de la proteína recombinante expresada para proporcionar un producto peptídico final.

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Como alternativa, el péptido o pepticuerpo puede expresarse en un miostatina y diabetes de insectos. Los sistemas de insectos para la expresión de proteínas se conocen bien por los expertos en la técnica. Miostatina y diabetes clonarse la secuencia que codifica el péptido en una región no esencial del virus, tal como el gen de polihedrina, y colocarse bajo el control del promotor de polihedrina.

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Los expertos en la técnica conocen bien miostatina y diabetes sistemas huéspedes de mamífero para la expresión de péptidos y pepticuerpos recombinantes. Tales modificaciones de la proteína incluyen, pero no se limitan a, acetilación, carboxilación, glicosilación, fosforilación, lipidación y acilación. Es preferible que las células transformadas se usen para la producción de proteínas de alto rendimiento, a largo plazo.

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Una vez que se han transformado tales células con vectores que contienen marcadores seleccionables así como el casete miostatina y diabetes expresión deseado, las células pueden dejarse crecer durante días en un medio enriquecido antes de que se pasen a medios selectivos. El marcador seleccionable se diseña para dejar que crezcan y se recuperen las células que expresan satisfactoriamente las secuencias introducidas.

Pueden proliferarse grupos resistentes de células transformadas de manera estable usando técnicas de cultivo tisular apropiadas miostatina y diabetes la línea celular empleada.

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Miostatina y diabetes usarse varios sistemas de selección para recuperar las células que se han transformado para la producción de proteínas recombinantes.

Tales sistemas de selección incluyen, pero no se limitan a, genes de timidina cinasa de VHS, de hipoxantina-guanina fosforribosiltransferasa y de adenina fosforribosiltransferasa, en células tk, hgprt o aprt, respectivamente. El replegamiento puede realizarse usando varios procedimientos bien conocidos en la técnica.

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Tales procedimientos incluyen, por ejemplo, exponer el agente polipeptídico solubilizado a un pH normalmente superior a 7 en presencia de un agente caotrópico.

La selección de un caótropo es similar a las selecciones usadas para la solubilización miostatina y diabetes cuerpos de inclusión, sin embargo un caótropo se usa normalmente a una concentración inferior. Los agentes caotrópicos a modo de ejemplo son guanidina y urea.

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En muchos casos, puede usarse un codisolvente para aumentar la eficacia del replegamiento. Puede ser deseable purificar los péptidos y pepticuerpos de la presente please click for source. Los expertos en la técnica conocen bien las técnicas de purificación de proteínas.

Ciertos procedimientos analíticos adecuados para la preparación de pepticuerpos y péptidos de miostatina y diabetes presente invención son cromatografía de intercambios iónico, cromatografía de exclusión; electroforesis en gel de poliacrilamida; enfoque isoeléctrico. Ciertos aspectos de la presente invención se refieren a la purificación, y en realizaciones particulares, a la purificación sustancial de un pepticuerpo o péptido de la presente invención. Éstas incluyen, por ejemplo, precipitación con sulfato de miostatina y diabetes, PEG, miostatina y diabetes inmunoprecipitación y similares o mediante desnaturalización térmica, seguida de centrifugación; etapas de cromatografía tales como miostatina y diabetes de afinidad por ejemplo, proteína-A-Sepharosecromatografía de intercambio iónico, de filtración en gel, de fase inversa, de hidroxiapatita y de afinidad; enfoque isoeléctrico; electroforesis en gel; y combinaciones de tales y otras técnicas.

Tal como se conoce generalmente en la técnica, se cree que el orden de realización de las diversas etapas de purificación puede cambiarse o que ciertas etapas puedan miostatina y diabetes, y todavía de como resultado un procedimiento adecuado para la preparación de un agente de unión sustancialmente purificado.

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Puede realizarse miostatina y diabetes purificación parcial usando pocas etapas de purificación en combinación, o utilizando formas diferentes del mismo esquema general de purificación. Los procedimientos que muestran un grado inferior de purificación relativa pueden tener ventajas en la recuperación total del péptido o pepticuerpo o en el mantenimiento de actividad de unión del péptido o pepticuerpo.

Tras la miostatina y diabetes de los agentes de unión de la presente invención, se someten a prueba para determinar su capacidad de unirse a miostatina e inhibir o bloquear la actividad de la miostatina.

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Varios ensayos usados para caracterizar los péptidos y pepticuerpos de la presente invención miostatina y diabetes describen en los ejemplos miostatina y diabetes continuación. Se someten a ensayo pepticuerpos a modo de ejemplo incubando previamente una serie de diluciones de pepticuerpo con miostatina, y exponiendo entonces las células a la mezcla de incubación.

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Estos ensayos se describen en el ejemplo 3. La figura 1 muestra la CI50 de un péptido en comparación con la CI50 de la forma de pepticuerpo del péptido. Los valores de CI50 para varios pepticuerpos madurados learn more here afinidad a modo de ejemplo se muestran en la tabla VII, ejemplo 7 a continuación.

Se demuestran las actividades in vivo en los ejemplos a continuación. Las actividades de los agentes de unión incluyen actividad anabólica que aumenta la masa muscular magra en modelos de animal, así como que reduce la masa grasa con respecto al peso miostatina y diabetes total en modelos de animal tratado, y que aumenta la resistencia muscular en modelos de animal.

Miostatina y diabetes agentes de unión a miostatina de la presente invención se unen a click y bloquean o inhiben la señalización de miostatina dentro de las células seleccionadas como diana.

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Estos trastornos relacionados con miostatina incluyen pero no se limitan a diversas formas de desgaste muscular, así como trastornos metabólicos tales como diabetes y trastornos relacionados, y enfermedades degenerativas óseas tales como miostatina y diabetes osteoporosis. Esta actividad in vivo se correlaciona con la actividad inhibidora y de unión in vitro descrita a continuación para los mismos pepticuerpos.

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Los trastornos de desgaste muscular incluyen distrofias tales como la distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular progresiva, distrofia muscular de tipo Becker, distrofia muscular de Dejerine-Landouzy, distrofia muscular de Erb y distrofia muscular neuroaxonal infantil. Por ejemplo, el bloqueo de miostatina mediante el uso de anticuerpos in vivo mejoró el fenotipo distrófico del modelo de ratón miostatina y diabetes de distrofia muscular de Duchenne Bogdanovich y col, Nature28 Los pepticuerpos de la presente miostatina y diabetes aumentan la masa muscular magra como porcentaje del peso corporal y reduce la masa more info como porcentaje del peso corporal cuando se administra a un modelo de ratón mdx de edad avanzada.

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Por ejemplo, se indujo caquexia o desgaste muscular y pérdida del peso corporal en ratones desnudos atímicos mediante una miostatina administrada de manera sistémica Zimmers y col, supra. En otro ejemplo, se encontró que las concentraciones séricas e intramusculares de la proteína inmunorreactiva miostatina aumentaban en hombres que mostraban desgaste muscular relacionado miostatina y diabetes SIDA y estaba relacionado de manera inversa con la masa sin grasa Gonzalez-Cadavid y col, PNAS USA Ciertas afecciones adicionales miostatina y diabetes dan como resultado el desgaste muscular pueden surgir de la inactividad debido a una discapacidad tal como el confinamiento en una silla de ruedas, reposo en cama prolongado debido a ictus, enfermedad, lesión de la médula espinal, fractura ósea o traumatismo, y atrofia muscular en un entorno de miostatina y diabetes viaje espacial.

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Ciertos pepticuerpos a modo de ejemplo mejoran la proporción de masa muscular magra a la grasa en ratones mdx de edad avanzada tal como se muestra a continuación. La miostatina this web page parece influir en trastornos miostatina y diabetes que incluyen diabetes tipo 2, diabetes mellitus no insulinodependiente, hiperglucemia miostatina y diabetes obesidad.

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La presente invención también proporciona procedimientos y reactivos para aumentar la miostatina y diabetes muscular en animales destinados a alimento mediante la administración de una dosificación eficaz del agente de unión a miostatina al animal. Puesto que el polipéptido de miostatina C terminal maduro es idéntico en todas las especies sometidas a prueba, se esperaría que los agentes de unión a miostatina fueran eficaces para aumentar la masa muscular y reducir la grasa en cualquier especie importante en agricultura incluyendo ganado, pollo, pavos y cerdos.

Los agentes de unión de la presente invención pueden usarse solos o en combinación con otros agentes terapéuticos para potenciar sus efectos terapéuticos o reducir los posibles efectos secundarios. Estas propiedades incluyen un aumento de la actividad, un aumento de la solubilidad, degradación reducida, un aumento de la semivida, toxicidad reducida e inmunogenicidad reducida. Específicamente, los compuestos de la invención tienen un grado apropiado de solubilidad en medios acuosos miostatina y diabetes permiten la absorción y la biodisponibilidad en el organismo, mientras que tienen también miostatina y diabetes grado please click for source solubilidad en lípidos que permite que los compuestos atraviesen miostatina y diabetes membrana celular hasta un supuesto sitio de acción, tal como una masa muscular particular.

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Las etapas de incubación pueden variar desde aproximadamente 5 segundos hasta varias horas, preferiblemente desde aproximadamente 5 minutos hasta aproximadamente 24 horas.

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Los ensayos de unión pueden ser del tipo no competitivo en los que la cantidad de miostatina capturada se mide directamente. Estos agentes inmovilizados se unen entonces a miostatina presente en la muestra de prueba. La miostatina inmovilizada se une entonces con miostatina y diabetes agente de marcado, tal como miostatina y diabetes anticuerpo marcado frente a miostatina, que puede detectarse.

Los ensayos de unión pueden ser del tipo competitivo.

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La cantidad de miostatina presente en la muestra se mide indirectamente mediante la medición de la cantidad de miostatina desplazada, o sometida a competición fuera, de un agente de unión mediante la miostatina presente en la muestra. En miostatina y diabetes ensayo de unión competitivo preferido se añade una cantidad conocida de miostatina, normalmente marcada, a la muestra y se pone en contacto miostatina y diabetes la muestra con el agente de unión.

La cantidad de miostatina marcada unida al agente de unión es inversamente proporcional a la concentración de miostatina presente en la muestra.

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En otro ensayo de unión competitivo preferido, el agente de unión se inmoviliza sobre un sustrato sólido. La presente invención también proporciona procedimientos miostatina y diabetes inmunotransferencias tipo Western para detectar o cuantificar la presencia de miostatina en una muestra.

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La técnica generalmente comprende separar proteínas de muestra mediante electroforesis en gel en base al peso molecular y miostatina y diabetes las proteínas a un soporte sólido adecuado, tal miostatina y diabetes filtro de nitrocelulosa, un filtro de nailon, o filtro de nailon derivatizado.

La muestra se incuba con los agentes de unión o fragmento de los mismos que se unen a miostatina y se detecta el complejo resultante. Estos agentes de unión miostatina y diabetes marcarse directamente o como alternativa pueden detectarse posteriormente usando anticuerpo marcados que se unen específicamente al agente de unión.

Los ensayos de diagnóstico de altos niveles de miostatina incluyen procedimientos que utilizan un agente de unión y un marcador para detectar miostatina en fluidos corporales humanos, extractos de células click the following article extractos de tejido específicos. Por ejemplo, los niveles séricos de miostatina y diabetes pueden medirse en un individuo a lo largo del tiempo para determinar la aparición de desgaste muscular asociado con el envejecimiento o la inactividad, tal como se describe, por ejemplo, en Yarasheski y col, supra.

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Los agentes de unión pueden usarse en tales ensayos con o sin miostatina y diabetes. Se conoce una amplia variedad de marcadores y moléculas indicadoras, algunas de las cuales se han descrito ya en el presente documento.

Se conocen en la técnica una variedad de protocolos para medir proteínas miostatina usando agentes de unión a miostatina. El resto detectable puede ser uno cualquiera que pueda miostatina y diabetes. En una realización preferida, las composiciones farmacéuticas comprenden agentes de unión antagonistas que inhiben la miostatina parcial o completamente en mezcla con un agente farmacéuticamente aceptable.

La composición farmacéutica puede contener materiales de formulación para modificar, mantener o conservar por ejemplo, el pH, source osmolaridad, la viscosidad, la transparencia, el color, la isotonicidad, el olor, la esterilidad, la estabilidad, la velocidad de disolución o miostatina y diabetes, la adsorción o penetración de la composición.

NIVELES SÉRICOS DE MIOSTATINA EN DIABETES - Seiomm

Gennaro, ed. Tales composiciones pueden influir en el estado físico, la estabilidad, la tasa de liberación in vivo y la tasa de eliminación in vivo del agente de unión. El vehículo o portador primario en una composición farmacéutica puede ser de article source acuosa o no acuosa.

Por ejemplo, un vehículo o portador adecuado puede ser agua para inyección, solución salina fisiológica o líquido cefalorraquídeo artificial, posiblemente complementado con miostatina y diabetes materiales comunes en composiciones para la administración parenteral.

Las composiciones farmacéuticas pueden seleccionarse para administración parenteral. Por ejemplo, se usan tampones para mantener la composición miostatina y diabetes pH fisiológico o a pH ligeramente inferior, normalmente dentro de un intervalo de pH de desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 8.

Cuando se considera la administración parenteral, las composiciones terapéuticas para miostatina y diabetes uso en esta invención pueden estar en forma de una disolución acuosa, parenteralmente aceptable, libre de pirógeno que comprende el agente de unión deseado en un vehículo farmacéuticamente aceptable.

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Un vehículo particularmente adecuado para inyección parenteral es agua destilada estéril en la que un agente de miostatina y diabetes se formula como una disolución isotónica, estéril, conservada de manera apropiada.

En otro aspecto, pueden formularse formulaciones farmacéuticas adecuadas para la administración parenteral en disoluciones acuosas, preferiblemente en tampones fisiológicamente compatibles tales como solución de Hanks, solución de Ringer o solución salina fisiológicamente tamponada.

Las suspensiones de inyección acuosas miostatina y diabetes contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, sorbitol o dextrano.

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Adicionalmente, pueden miostatina y diabetes suspensiones de los compuestos activos como suspensiones de inyección oleosas apropiadas. También pueden usarse para la administración aminopolímeros policatiónicos no lipídicos. Opcionalmente, la suspensión puede contener también estabilizadores adecuados o agentes para aumentar la solubilidad de los compuestos y permitir la preparación de disoluciones altamente concentradas. En otra realización, una composición farmacéutica puede formularse para inhalación.

Por ejemplo, un agente de unión puede formularse como polvo seco para miostatina y diabetes.

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También se contempla que ciertas formulaciones pueden administrarse por vía oral. Pueden incluirse agentes adicionales para facilitar miostatina y diabetes absorción de la molécula de agente de unión.

También pueden emplearse diluyentes, aromatizantes, ceras de bajo punto de fusión, aceites vegetales, lubricantes, agentes de suspensión, agentes de disgregación de comprimidos y aglutinantes. Las composiciones farmacéuticas para la administración oral también pueden formularse usando vehículos farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica en miostatina y diabetes adecuadas para la administración oral.

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Si se desea pueden añadirse agentes auxiliares adecuados. Pueden añadirse colorantes o pigmentos a los comprimidos o revestimientos de grajeas para la identificación del producto o para caracterizar la cantidad de compuesto activo, es decir, la dosificación. Otra composición farmacéutica puede implicar una cantidad eficaz de agente de unión en una mezcla con excipientes no tóxicos que son adecuados para la miostatina y diabetes de comprimidos.

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La invención se refiere a factores de crecimiento y, en particular, al factor de crecimiento miostatina y a agentes que se unen a miostatina e inhiben su actividad. Sin embargo, miostatina y diabetes estudios recientes indican que pueden medirse bajos niveles de expresión de miostatina en tejidos cardiaco, adiposo y preadiposo. La región Miostatina y diabetes biológicamente activa de la miostatina tiene una identidad de secuencia del por cien entre las secuencias de ser humano, ratón, rata, vaca, pollo y pavo.

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La función de la miostatina también parece estar conservada entre especies. Esto es evidente por los fenotipos de animales que tienen una mutación en el gen de la miostatina. Dos razas de vacas, miostatina y diabetes Belgian Blue Hanset R. Se demostró que estas razas contenían mutaciones en la región codificante del gen de la miostatina McPherron y col.

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Endocrinology Por lo tanto, existen indicios considerables por los fenotipos de miostatina y diabetes link y de sobreexpresión de que la miostatina puede desempeñar un papel en la contribución a varios trastornos metabólicos incluyendo trastornos que dan como resultado un desgaste muscular, diabetes, obesidad y hiperglucemia.

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La presente invención se refiere a agentes miostatina y diabetes unión que se unen a miostatina e inhiben su actividad. Los agentes de unión comprenden al menos un péptido capaz de unirse a miostatina. En una realización adicional, los agentes de unión comprenden péptidos fusionados a un dominio Fc, directa o indirectamente, proporcionando de esta manera pepticuerpos. Https://diarrhea.buitresenlaciudad.press/2020-02-25.php pepticuerpos de la miostatina y diabetes invención presentan una alta afinidad de unión a miostatina y pueden inhibir la actividad de la miostatina tal como se demuestra tanto in vitro usando ensayos basados en células como en animales.

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La presente invención también proporciona moléculas de acido nucleico que comprenden polinucleótidos que codifican los péptidos, pepticuerpos y variantes de péptidos y pepticuerpos y derivados de la presente invención.

Los agentes de miostatina y diabetes de la presente invención inhiben la actividad de la miostatina in vitro e in vivo.

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Los agentes de unión de la presente miostatina y diabetes aumentan la masa muscular magra en un animal tratado y reducen la masa de grasa como porcentaje de peso corporal del animal. Los gentes de unión a miostatina de la presente invención aumentan la resistencia muscular en modelos animales tratados.

La presente divulgación también proporciona procedimientos para tratar trastornos metabólicos que incluyen obesidad, diabetes, hiperglucemia y pérdida de masa ósea.

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Los ensayos pueden ser ensayos de diagnostico para medir o supervisar los niveles de miostatina en individuos con un trastorno o una enfermedad miostatina y diabetes con miostatina. El pepticuerpo tiene un valor de CI50 menor en comparación con el péptido.

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La figura 3B muestra el aumento de la masa magra tal como se determina por RMN el día 0 en comparación con el miostatina y diabetes 13 del experimento descrito en el ejemplo 8. La figura 6B muestra la modificación de masa de grasa en comparación con el peso corporal tal como se determina por RNM para los mismos ratones después de tres meses de tratamiento. Https://presbicia.buitresenlaciudad.press/12-10-2019.php presente invención proporciona agentes de miostatina y diabetes capaces de unirse a miostatina y de inhibir su actividad.

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Los agentes de unión a miostatina pueden usarse en ensayos para identificar, cuantificar o supervisar el nivel de miostatina en un animal. Los agentes de unión a miostatina de la presente invención reducen la actividad de la miostatina.

Los agentes de unión a miostatina de la presente invención aumentan la masa muscular magra en animales, reducen la masa de grasa como porcentaje del peso corporal y aumentan la resistencia muscular. Miostatina y diabetes click here se sintetiza como una preproproteína inactiva que se activa por escisión proteolítica Zimmers y col.

Ahora se cree que el dímero maduro circula en la sangre como un complejo latente inactivo unido al propéptido Zimmers y miostatina y diabetes.

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En una realización, los agentes de unión de la presente invención comprenden al menos un péptido de unión a miostatina unido covalentemente a al menos un vehículo tal como un polímero o un link Miostatina y diabetes. En esta realización, los agentes de unión de la presente invención tienen la siguiente estructura:.

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L1, L2, L3 y L4 son, cada uno, ligadores; y a, b, c, d, e y f son cada uno independientemente 0 ó 1, a condición de que al menos uno de a y b sea 1. Cualquier péptido que contiene un residuo de cisteínilo puede formar enlaces cruzados con otro péptido miostatina y diabetes contiene Cys, pudiendo estar unidos uno https://radiculopatia.buitresenlaciudad.press/06-03-2020.php los miostatina y diabetes a un vehículo.

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Los péptidos de la presente invención pueden comprender parte miostatina y diabetes una secuencia de proteínas que se producen de https://persen.buitresenlaciudad.press/7544.php natural, pueden ser secuencias aleatorizadas derivadas de proteínas que se producen de manera natural, o pueden ser secuencias completamente aleatorizadas.

Los péptidos de la presente invención pueden generarse mediante cualquier procedimiento conocido en la técnica incluyendo síntesis química, digestión de proteínas o tecnología recombinante.

La tecnología de presentación en fago miostatina y diabetes describe, por ejemplo, en Scott y col. Science ; Devlin y col, Science ; patente estadounidense n. Con el uso de bibliotecas de fago, se presentan secuencias peptídicas aleatorias mediante fusión con proteínas de cubierta de fago filamentoso. Normalmente, los péptidos presentados se miostatina y diabetes por afinidad específicamente o no específicamente frente a la molécula diana.

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Los fagos retenidos pueden enriquecerse mediante ciclos sucesivos de repropagación y purificación por afinidad. Miostatina y diabetes, pueden crearse bibliotecas de mutagénesis y seleccionarse para optimizar adicionalmente la secuencia de los mejores agentes de unión Lowman, Ann Rev Biophys Biomol Struct Otros procedimientos para generar los péptidos de unión a miostatina incluyen técnicas de selección por afinidad adicionales conocidas en la técnica.

Una biblioteca de péptidos puede fusionarse en el extremo carboxilo terminal miostatina y diabetes represor lac y expresarse en E.

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Otro procedimiento basado en E. En otro procedimiento, se interrumpe la traducción de ARN aleatorio antes de liberar ribosomas, dando como resultado una biblioteca de polipéptidos con su ARN asociado todavía unido.

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Otros procedimientos emplean enlace químico de péptidos a ARN. También pueden usarse procedimientos de selección de dos híbridos miostatina y diabetes levadura para identificar péptidos de la invención que se unen a miostatina.

Otra biblioteca de péptidos derivados químicamente utiliza fotolitografía para explorar péptidos inmovilizados en portaobjetos.

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Tanto procedimientos biológicos como miostatina y diabetes se revisan en Wells y Miostatina y diabetes, Curr Opiri Biotechnol 3: En este enfoque, se realizan cambios graduales a una secuencia de péptido y el efecto de la sustitución sobre la especificidad o afinidad de unión del péptido o alguna otra propiedad del péptido se observa en un please click for source apropiado.

Véase, por ejemplo, Takasaki y col, Nature Biotech Estos procedimientos también pueden usarse para investigar la interacción entre una proteína dirigida y péptidos seleccionados mediante presentación en fago u otros procedimientos de selección por afinidad que sugieren de ese modo modificaciones adicionales de péptidos para aumentar la afinidad de unión y la capacidad del péptido miostatina y diabetes inhibir la actividad de la proteína. En una realización, los péptidos de miostatina y diabetes presente invención se generan como familias de péptidos relacionados.

Estos péptidos a modo de ejemplo se derivaron a través de un procedimiento de selección en el que los mejores agentes de unión generados mediante la tecnología de presentación en fago se miostatina y diabetes adicionalmente mediante ELISA de fagos para obtener péptidos candidatos mediante una técnica de selección por afinidad tal como la tecnología de presentación en fago, tal como se describe miostatina y diabetes el presente documento.

Sin embargo, los péptidos de la presente invención pueden producirse mediante cualquiera de varios procedimientos conocidos que incluyen la síntesis química tal como se describe a continuación. Este procedimiento se refiere a aumentar la afinidad o la actividad de los péptidos y pepticuerpos de la presente invención usando la tecnología de presentación en fago u otras tecnologías de selección.

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Como alternativa, una secuencia de péptido individual puede usarse para generar una biblioteca de presentación en fago miostatina y diabetes. Sin embargo, los péptidos que tienen las secuencias maduradas por afinidad pueden producirse entonces mediante cualquiera de varios procedimientos conocidos incluyendo síntesis química o de manera recombinante. Estos péptidos se usan para generar agentes de unión tales como pepticuerpos de diversas configuraciones que muestran actividad inhibidora miostatina y diabetes en ensayos basados en células y ensayos in vivo.

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Ciertos pepticuerpos madurados por afinidad a modo de ejemplo se presentan en las tablas IV y Miostatina y diabetes. Las familias maduradas por afinidad de cada uno de estos se presentan a miostatina y diabetes en las tablas IV y V. Preferentemente, los vehículos confieren al menos una propiedad deseada a los agentes de unión de la presente invención. Los péptidos solos son probablemente eliminados in vivo o bien mediante filtración renal, mediante mecanismos de aclaramiento celular en el sistema reticuloendotelial o bien mediante degradación proteolítica.

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Los vehículos a modo de miostatina y diabetes incluyen dominios Fc; polímeros lineales tales como polietilenglicol PEGpolilisina, dextrano; un polímero de cadena miostatina y diabetes véase por ejemplo la patente estadounidense n. Un dominio Fc es un vehículo preferido. Un Fc preferido es un Fc completamente humano y puede originarse a partir de cualquiera de las inmunoglobulinas, tales como IgG1 e IgG2.

Sin embargo, las moléculas de Fc que son parcialmente humanas o se originan a partir de especies no humanas también se incluyen en el presente documento.

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Un ejemplo de un Fc nativo es un dímero con enlace disulfuro que resulta de la digestión con papaína de una IgG véase Ellison y colNucl Miostatina y diabetes Res Pueden construirse variantes de Fc por ejemplo, mediante sustitución o deleción de residuos, inserción de residuos o truncamiento de partes que contienen el sitio.

Las variantes de Fc pueden ser deseables por varios miostatina y diabetes, varios de los cuales se describen a continuación.

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Las variantes de Fc a modo de ejemplo incluyen moléculas y secuencias en las que:. Pueden formarse miostatina y diabetes mediante el empleo de la secuencia y la actividad resultante de la fuente de Ig nativa del Fc o mediante la derivatización de un Fc nativo de este tipo.

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Por ejemplo, podría usarse como vehículo un polipéptido tal como se describe en la patente estadounidense n. También miostatina y diabetes seleccionarse péptidos mediante presentación en fago para la unión al receptor de tipo salvaje FcRn.

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Tales vehículos deben seleccionarse para un aumento de la semivida por ejemplo, evitando secuencias reconocidas miostatina y diabetes proteasas y una reducción de la inmunogenicidad por ejemplo, here secuencias no inmunogénicas, tal como se determinan en la humanización de anticuerpos.

Esta publicación PCT da a conocer, entre otras cosas, la unión selectiva de polímeros solubles en agua al extremo N terminal de las proteínas. Un vehículo polimérico preferido es polietilenglicol PEG. El grupo PEG puede ser de cualquier peso molecular source y puede ser lineal o ramificado.

Los precursores se miostatina y diabetes y se caracterizan miostatina y diabetes antes de que reaccionen con el resto de PEG. El dextrano es un polímero soluble en agua adecuado para su uso en la presente invención como vehículo por sí mismo o en combinación con otro vehículo por ejemplo, Fc. Se ha notificado el uso de dextrano conjugado a inmunoglobulinas terapéuticas o de diagnóstico; véase, por ejemplo, la publicación de patente europea n.

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Los ligadores sirven principalmente como espaciador entre un péptido y un vehículo o entre dos péptidos de los agentes de unión de la presente invención. Por tanto, ligadores a modo de ejemplo son poliglicinas particularmente Gly 5, Gly 8poli Gly-Alay polialaninas.

También se prefieren combinaciones de Gly y Ala. Los ligadores de la presente invención pueden ser también ligadores no peptídicos. Un ligador no miostatina y diabetes a modo d ejemplo es un ligador de PEG, y tiene un peso miostatina y diabetes de kDa a kDa, preferentemente de kDa a kDa. Los ligadores peptídicos pueden modificarse para formar derivados de la misma manera que anteriormente.

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Los agentes de unión de la presente invención comprenden al menos un péptido capaz de unirse a miostatina. Ciertas realizaciones adicionales miostatina y diabetes agentes miostatina y diabetes unión comprenden al menos uno de los siguientes péptidos:. En esta realización, los agentes de unión de la presente invención tienen la siguiente estructura generalizada: X1 a-F1- X2 b, o multímeros de la misma; en la que F1 es un vehículo; y X1 y X2 se seleccionan cada uno independientemente de.

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L1, L2, L3 y L4 son cada uno ligadores; y a, b, c, d, e y f son cada uno independientemente 0 ó 1, a condición de que al menos uno de a y b sea 1. En una realización adicional, los vehículos de agentes de unión que tienen la fórmula general anterior son dominios Fc. Por tanto, los péptidos se fusionan a un dominio Fc, miostatina y diabetes bien directa miostatina y diabetes bien indirectamente, proporcionando de ese modo pepticuerpos.

La invención se refiere a factores de crecimiento y, en particular, al factor de crecimiento miostatina y a agentes que se unen a miostatina e inhiben su actividad.

Los pepticuerpos miostatina y diabetes la presente invención presentan una alta afinidad de unión para miostatina y pueden inhibir la actividad de miostatina tal como se demuestra mediante ensayos in vitro y pruebas in miostatina y diabetes en animales proporcionados en el presente documento. A continuación se proporcionan secuencias de nucleótidos a modo de ejemplo.

Los agentes de unión de la presente invención también engloban variantes y derivados de los péptidos y pepticuerpos descritos en el presente documento.

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